蛋白质纯化实验方案与应用


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蛋白质纯化实验方案与应用




图书信息


作者: 吕宪禹 主编

出 版 社: 化学工业出版社

出版时间: 2010-6-1

字 数: 263000

页 数: 211

开 本: 16开

纸 张: 胶版纸

I S B N : 9787122080066

包 装: 平装

定价:58.00

内容简介


本书详细介绍了各类蛋白质纯化实验技术,包括材料的预处理、蛋白质的粗提、经典色谱方法、高效液相色谱、质谱、电色谱、分子印迹、电泳以及蛋白质检测的实验方案及应用实例。

强调可操作性,对每一项实验技术,都系统介绍其原理方法和实验过程,特别注重讲解问题分析及解决方案,让读者了解到每一点成就都是建立在大量方案设计、具体步骤以及实验结果的正确处理的基础之上。

不仅含有经典的实验技术,还特别突出了当前实验的新理论、新技术与新发展,给予蛋白质纯化专业人员以借鉴和引导作用。

本书对于遗传学、细胞生物学、分子生物学,以及医学和生物工程领域研究人员开展蛋白质相关研究,具有很强的参考价值。

目录


第1章 绪论

1.1 蛋白质的研究历史

1.2 蛋白质的理化性质和生物学特性

1.3 蛋白质纯化手段的历史回顾

1.4 纯化蛋白的应用

参考文献

第1部分 材料的预处理和蛋白质的粗提

第2章 不同来源材料的预处理

2.1 不同材料的预处理

2.1.1 植物材料的预处理

2.1.2 动物材料的预处理

2.1.3 微生物材料的预处理

2.2 细胞的破碎

2.2.1 机械法

2.2.2 非机械法

方案2.1 超声波法提取烟草叶中的3-磷酸甘油脱氢酶

方案2.2 从猪胰脏中提取胰凝乳蛋白酶

方案2.3 从大肠杆菌中提取诱导表达的(His)6-X

参考文献

第3章 蛋白质的沉淀

3.1 盐析法

3.2 有机溶剂沉淀法

3.3 等电点沉淀法

3.4 非离子多聚物沉淀法

3.5 选择性沉淀法

方案3.1 用盐析法选择性沉淀蛋白质

方案3.2 用有机溶剂沉淀蛋白质

方案3.3 使用蛋白质排阻和拥挤剂选择性沉淀蛋白质

参考文献

第4章 蛋白质的浓缩

4.1 吸附法

4.2 超滤法

4.3 沉淀法

4.4 透析法

4.5 冷冻干燥法

4.6 双水相分离法

方案4.1用透析袋进行脱盐、浓缩和更换缓冲液

方案4.2用不对称圆盘膜超滤进行浓缩或透析

参考文献

第2部分 色谱法分离纯化蛋白质

参考文献

第5章 凝胶过滤色谱

5.1 基本原理

5.2 实验方案设计

5.2.1 凝胶介质的选择

5.2.2 凝胶介质的预处理

5.2.3 色谱柱的选择

5.2.4 凝胶柱的装填

5.2.5 样品处理和上样

5.2.6 洗脱和收集

5.2.7 色谱柱的清洗、再生与保存

方案5.1 用凝胶过滤色谱更换缓冲液

方案5.2 凝胶过滤色谱分离三种分子量不同的蛋白质

参考文献

第6章 离子交换色谱

6.1 基本原理

6.2 实验方案设计

6.2.1 离子交换介质的选择

6.2.2 流动相的选择

6.2.3 色谱柱的选择

6.2.4 离子交换剂预处理和装柱

6.2.5 加样

6.2.6 洗脱

6.2.7 洗脱组分的收集和分析

6.2.8 离子交换剂的再生、清洗与储存

方案6.1 弱阴离子交换色谱和强阳离子交换色谱在分离纯化单克隆抗体中的应用

参考文献

第7章 亲和色谱

第8章 疏水色谱

第9章 分子印迹技术

第10章 高效液相色谱法分离纯化蛋白质

第11章 毛细管电色谱及其在蛋白质分离纯化中的应用

第12章 其他色谱分析方法简介

第3部分 电泳法分离纯化蛋白质

第13章 聚丙烯酰胺凝胶电泳

第14章 聚丙烯酰胺等电聚焦

第15章 双向电泳

第4部分 蛋白质纯化效果的评价和蛋白质分析

第16章 蛋白质浓度、纯度及活性的分析

第17章 蛋白质的分析及应用