Elek平板试验
Elek平板试验
白喉杆菌的有毒菌株可产生白喉外毒素，白喉抗毒素可与其特异性结合，中和白喉外毒素的毒性，可用细菌培养法和动物试验予以证实。
【原理】
Elek平板毒力试验是一种体外的毒力测定方法。通过观察白喉抗毒素与白喉外毒素的双向琼脂扩散现象，判断所培养的白喉杆菌的产毒性。
【材料】
1．产毒素的白喉杆菌、类白喉杆菌及待测的白喉杆菌吕氏血清斜面24h培养物。
2．Elek琼脂蛋白胨培养基。
3．白喉抗毒素(1000u/m1)、马或兔血清(无菌)、无菌滤纸条(6.0×1.5cm)、无菌5ml刻度吸管、无菌平皿及镊子等。
【方法】
1．将Elek琼脂蛋白胨培养基10ml加热融化，待冷至50～55℃时，加入无菌的马或兔血清2ml，立刻混匀，并倾注平板。
2．趁琼脂未凝固前，用无菌镊子将浸有白喉抗毒素(1000u/m1)的滤纸条(尽量使滤纸条上的抗毒素流尽)贴于平板中央，待琼脂凝固后将平板置37℃温箱内1～2h(平板面朝下)，使培养基略干燥。
3．如图14-1所示接种细菌，以接种环取产毒素白喉杆菌、类白喉杆菌和待检的白喉杆菌分别以与滤纸条成垂直的方向划线接种，接种线须密且集中，接种的菌量宜多。若用此法测未知标本需设阳性对照(产毒株)及阴性对照(无毒株)，一般每个平板可接种5～6个标本。置37℃培养24、48、72h观察结果。
【结果】
注意观察在接种线两侧距滤纸条约1cm处有无与接种线呈45角的白色沉淀线出现。有沉淀者，白喉杆菌毒力试验阳性，该菌株产生白喉外毒素；无沉淀线者，白喉杆菌毒力试验阴性，该菌株不产生白喉外毒素。